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EQUIMDIET

Estrategias Quimiopreventivas frente a Compuestos Carcinogénicos de la Dieta

UCM
Facultad de Veterinaria
Universidad Complutense de Madrid


 


Nuestro Grupo de investigación tiene una amplia experiencia en Seguridad Alimentaria. Durante los últimos 20 años hemos desarrollado y puesto a punto numerosos métodos de toxicidad y genotoxicidad in vitro para detectar la presencia de compuestos tóxicos, mutagénicos y/o carcinogénicos, en los alimentos, utilizando para ello cultivos celulares de animales y humanos. La Metodología que realizamos en nuestro laboratorio es la siguiente:

A. Ensayos de Citotoxicidad y Mecanismos de Acción:

1. Evaluación de la Viabilidad Celular: Se utilizan algunos marcadores de citotoxicidad como son: la actividad mitocondrial (actividad de la enzima succinato mitocondrial, Método MTT), la permeabilidad de la membrana (liberación de la lactato-deshidrogenasa, Método LDH), la pérdida de potencial de membrana mitocondrial (??m), el metabolismo energético (contenido en ATP), y determinación del glutation (GSH), de la superoxidodismutasa (SOD) y de la catalasa como enzimas antioxidantes.

2. Inducción de Apoptosis: Se utilizan diferentes métodos como: Microscopía de fluorescencia (Tinción con Hoechst 33342 y con Naranja de Acridina), Citometría de flujo (Contenido de ADN, Anexina, TUNEL, Actividad de Caspasas, Determinación de Proteínas Intracelulares Bax y Bcl-2, especies reactivas del oxígeno, EROs), Western Blot (citocromo c y PARP).

B. Ensayos de Genotoxicidad:

1. Determinación del daño al DNA: Inducción de la ruptura de las cadenas del DNA, del daño oxidativo: oxidación de purinas y pirimidinas y del daño alquilativo (Ensayo Cometa).

2. Ensayos de Mutagenicidad: utilizando bacterias (Test de Ames) y líneas celulares (Ensayo de Mutación Génica).

C. Ensayos Inmunoenzimáticos ELISA: Se utilizan distintos formatos: ELISA Indirecto, Directo, Sándwich, Competitivo

D. Ensayos de determinación de la actividad enzimática del citocromo P450 (Fase I y II), utilizando microsomas humanos: medida de la actividad del citocromo CYP2E1, CYP2A6, CYP1A1 y UDP-glucuronil-transferasa, etc.

E. Ensayos de absorción intestinal (Caco2): Resistencia eléctrica transepitelial (TER) y permeabilidad aparente. Evaluación de la actividad transportadora.



  • Líneas de acción del clúster de Agroalimentación y Salud
  • Sanidad Animal y Seguridad Alimentaria
  • Higiene y Tecnología de los Alimentos

 


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Integrantes
2


Imagen grupo
Responsable:
Paloma Morales Gómez

Referencia UCM: 910177

Keywords:

Seguridad Alimentaria.

Genotoxicidad.

Estrés Oxidativo.

Apoptosis.

Quimiopreventivos.

Carcinógenos.

Colorantes Metálicos.

Dieta.









Ministerio de Educación, Cultura y Deporte CEI Campus de Excelencia Internacional Ministerio de Economía y Competitividad
Proyecto financiado por el Ministerio de Educación, Cultura y Deporte, y el Ministerio de Economía y Competitividad en el marco del Programa Campus de Excelencia Internacional
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